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qPCR专用高效逆转录试剂盒
TOROBlue® qPCR RT Kit |
特别说明: 本品适用于荧光定量 PCR，如需普通 PCR 则逆转录产物不宜超过 1 kb。
高逆转录效率：采用双点突变MMLV逆转录酶，可高效合成cDNA。
宽泛围逆转录温度：在 37℃-60℃之间Ct值差异不大，可兼容其它公司逆转录条件。
引物独立组分：可使用于茎环法为microRNA 设计的引物或使用特异性引物进行逆转录。
1. 高温逆转录活性
以MS2 RNA为模板，稀释MS2 RNA到1000copies、100copies、10copies、1copies，设置一步法反应程序（仪器型号为博日LineGine9600），采用温度梯度设置从50-60℃的温度梯度。
图1 高温逆转录活性测试
Fig.1 Activity of reverse transcriptional test for high temperature
由图1可以看出，在1000copies模板浓度范围内，逆转录从50-60℃所得到的Cq值波动范围在1之内，说明该产品具有宽广的高温逆转录活性范围。
2.应用案例
以MS2 RNA为模板，稀释MS2 RNA到8ng及0.08ng两种添加量，用本产品逆转录，将逆转录产物稀释10倍后进行定量PCR扩增（ABI Step One Plus），对比进口T品牌的高灵敏逆转录酶，及不添加RNase抑制剂对反应体系的影响，如图2所示。
图2 扩增曲线
Fig.2 Amplification plot
由图2可以看出，反应体系中必须添加RNase抑制剂，否则会对Cq值具有很大影响；对比T品牌的试剂，本产品在低模板具有更好的逆转录效率，且△△Cq更接近理论值，即本产品更适合△△Cq法为基础的基因表达分析。
TOROBlue® qPCR RT Kit是TOROIVD公司专门针对qPCR开发的一款高效逆转录反应试剂盒。本试剂盒采用高性能TOROIVD® III逆转录酶和qPCR目的片段短链cDNA合成的最优化反应成分，能够高效率地合成适用qPCR的cDNA模板。该试剂盒将引物作为独立组分设计，也适用于茎环法的microRNA的逆转录。
货号 | 组分名称 | 包装规格 | 目录价 | 保存温度 |
RTQ-101 | TOROBlue® qPCR RT Kit | 10uL反应体系200次 | 600元 | -20℃ 保存
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组分内容：RT Master Mix 100 μL/管；Primer Mix 100 μL/管；5×RT Buffer 400 μL/管；DNase/RNase-Free Water，1 ml/管。 |
-20℃ 可保存两年。
