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  • TOROIVD® ASFV-VP72 Gene qPCR Detection Reagent Set V
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  • TOROIVD® ASFV-VP72 Gene qPCR Detection Reagent Set V

    高灵敏度高特异且低背景干扰的非洲猪瘟快速筛查体系

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    高灵敏度高特异且低背景干扰的非洲猪瘟快速筛查体系




     高灵敏度高特异且低背景干扰的非洲猪瘟快速筛查体系


     TOROIVD® ASFV-VP72 Gene qPCR Detection Reagent Set V

          特别说明: 本品仅限于科学研究及实验室自检,不可直接用于兽医诊断              


      高速高灵敏: 使用高灵敏TOROIVD® 5G 聚合酶结合专门针对非洲猪瘟优化的引物探针体系, 具有行业领先的超高灵敏度,最大避免了非洲猪瘟检测的漏检率; 其性能已得到客户大量验证。

      可以进行多重引物探针扩增: 该试剂盒经过验证,可同时检测多个目的基因,允许同时检测其它通道 以提高效率或质量控制目的。

      低基线扰动: 经过反应体系优化,提高了对耗材和设备的通用性和兼容性,最大降低了基线的扰动性,防止检测结果误判。

      与 DNA 兼容的宽泛动态范围: 该试剂盒经过优化,可提供用于 DNA 靶标的高特异性和动态范围。这种输入灵活性有助于简化实验室中不同工作流程的数量,从而提高效率。

      避免污染: 该试剂盒在反应缓冲液中含有 dUTP 和 UNG。可以去除 PCR 产物造成的交叉污染,从而降低假阳性率。

     高稳定性: 37℃热加速 15 天检测性能几乎不变,30 天仅降低 0.5 个 Ct 值;方便存储和运输。


     1. TS-ASFV-05扩增性能验证

            以非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72蛋白)的质粒为模板,以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,采用TS-PPM-A05与QPT-200U进行扩增,以上一批的TS-PPM-A05为对照,实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图。

           

    图1 TS-ASFV-05性能验证     


      结论: 不同批间的TS-PPM-A05扩增曲线基本一致,CT值重合,表明TS-ASFV-05扩增性能验证无误,可用于非洲猪瘟病毒的快速检测。


     2. TS-ASFV-05 NTC性能验证

      以非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72蛋白)的质粒为模板,以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,采用TS-PPM-A05与QPT-200U进行扩增,以上一批的TS-PPM-A05为对照,实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图。

    图2  TS-ASFV-05 NTC性能验证-对照

    图3  TS-ASFV-05 NTC性能验证-实验组



      结果:  不同批间的TS-PPM-A05进行NTC性能验证,除阳性对照外,均无扩增。

           结论: TS-ASFV-05的不同批间NTC性能验证无误,表明该批间不存在污染,可用于非洲猪瘟病毒的快速检测。


     3. TS-ASFV-05 与竞品对比性能验证

      以非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72蛋白)的质粒为模板,以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,采用TS-PPM-A05与QPT-200U进行扩增,以竞品Q集团试剂为对照,实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图。 


    图4  竞品Q集团试剂性能验

    图5  TS-ASFV-05性能验证


      结果:  TS-ASFV-05相比于竞品Q集团试剂具有更好的检出率及曲线一致性。

            结论: TS-ASFV-05相比于竞品Q集团试剂在非洲猪瘟检测方面具有更强的检测灵敏度,基线期更稳定。


      本产品中使用高速高灵敏的 TOROIVD® 5G 聚合酶,具有极高的灵敏度和扩增效率。结合世界动物卫生组织(OIE)公布的高特异引物和探针序列经过调优组合,可用荧光定量 PCR法对低至 1-3copies/反的非洲猪瘟病毒进行高速超灵敏检测,最大程度降低了检测假阴性。同时反应体系使用高性能 UNG 防污染系统,最大程度降低检测假阳性。

      本试剂组产品货号: TS-ASFV-05,  包含 500头份用量的荧光定量 PCR 预混液及引物探针混合液。


    组分货号

    组分名称

    包装规格

    数量

    保存温度

    QPT-200U

    TOROIVD® 5G qPCR Premix with UNG 

    (中文名:天筛®防污染 qPCR 预混液)

    1.25mL/管

    4 管

    2-8℃

    保存一年

    TS-PPM-A05

    TOROIVD® ASFV-VP72 Primer&Probe Mix V

    (中文名: 天筛®非瘟 VP72 反应液V)

    1.25ml/管

    2 管

    2-8℃

    避光保存一年


      本试剂可在 2-8℃稳定保存一年, 无需-20℃保存。

      本试剂使用冰袋运输,冰袋融化不影响性能,无需干冰运输。

      若干冰运输或-20℃保存,使用前请恢复到室温,且完全融化后使用。





    1. 问:该试剂适用哪些种型号的仪器? 


        答: 已经验证的仪器包括Roche LightCycler 96,ABI Step One Plus,西安天隆 Gentier 96R和Gentier 48E,杭州博日LineGene 9600 Plus, Biorad CFX 96,ABI QuantStudio 1,杭州柏恒Q1600及宏石SLAN-96S 等实时荧光定量PCR检测系统;其它仪器未验证,我们可以配合验证。


    2. 问:能否兼容其它试剂的循环条件?


        答: 我司试剂能兼容绝大部分其它试剂的循环条件,但是要来电咨询是否可以完全替代。


    3. 问:能否兼容其它快速仪器的快速循环条件?


        答: 我司能兼容绝大部分快速循环条件,但是各个快速仪器的控制温度精度及采光有差异,请来电咨询协助微调优化。


    4. 问:试剂可以在-20℃保存吗?


        答:试剂在-20℃保存三年以上,但是每次使用时需要完全室温融化,不可有任何结晶,否则影响性能. 所以为了使用方便,建议 2-8℃稳定保存一年。


    5. 问:荧光曲线前期基线期不平整,有波动。


        答:试剂未完全解冻,需于室温静置 30min 使其完全恢复至室温。模板与体系未完全混匀,加样时将模 板加入液面以下。


    6. 问:荧光曲线未出现平台期。


        答:优化引物探针设计和引物探针使用浓度。


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