高速、高灵敏、高特异、防污染、探针一步法RT-qPCR试剂盒
高速高灵敏高特异防污染探针一步法RT-qPCR预混液 TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0 |
特别说明: 本品仅限于科学研究及实验室自检,不可直接用于诊断。
TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0(QPR-303UD)可在单管内同时进行高灵敏高重复的多重RT-qPCR分析,能检测多达5个RNA/DNA靶点。该试剂盒采用TaqMan®探针检测病毒,包括UNG酶、dsDNase酶、耐高温MMLV逆转录酶、RNase抑制剂、TOROIVD® 5G DNA聚合酶和反应缓冲液。改进的酶提高了对PCR抑制剂的高耐受性和在酶自身的热稳定性。该一步试剂由于其反应设置简单,适用于高通量分析。该试剂盒适用于高速RT-qPCR,可实现对目标的准确检测和定量有可能在广泛的动态范围内获得高可重复性和可靠的实时PCR结果。
高速高灵敏:本试剂可进行高速 PCR 分析,配合高速 PCR 仪时间可以缩短到 30min 以内,适合分子POCT 用途。
适合多重 RT-qPCR:本试剂已经验证可进行五重 RT-qPCR 分析,实现单管内同时分析多个靶标或内标,降低试剂成本及提高分析效率。
直接 RT-qPCR:本试剂中含有高抗抑制能力强的改造型聚合酶,结合调优过的反应缓冲系统,可以根据不同的样品类型开发 RNA 免提取的直接 RT-qPCR 系统,从而缩短检测时间。
强防污染能力:采用热敏 UNG 酶和微量热敏双链 DNA 核酸酶双酶系统构成强有力的污染清除系统,可有效清除气溶胶中 PCR 扩增产物污染,最大程度避免检测假阳性。
1. 清除污染能力
使用含U的PCR产物对比QPR-300和QPR-303UD扩增,QPR-303UD完全清除含U的PCR产物污染。
2. 直扩能力
使用新冠假病毒进行4个梯度稀释,无需提取即可对ORF1ab及N基因进行正常扩增。
3. 多重PCR
可高效地进行四重qPCR扩增。
本试剂组产品货号: QPR-303UD
组分货号 | 组分名称 | 包装规格 | 数量 | 保存温度 |
QPR303UD13 | RT-qPCR Enzyme MixUD | 260μL/管 | 1管/袋 | -20℃ 保存两年 |
ASF101BB | 2×5G qPCR Buffer BB | 1.25mL/管 | 2管/袋 | -20℃ 保存两年 |
1. 试剂盒-20℃冷冻保存,有效期24个月。运输过程中,温度应为-15℃到-25℃冷链。
2. 试剂开封后,置于4℃条件下保质期为60天,-20℃条件下保质期为24个月。
3. 2×5G qPCR Buffer BB请室温完全融化后使用,否则会降低使用效果。
█ QPR-303UD与TA/TB品牌灵敏度对比
实验材料:MS2RNA
实验仪器:ABI7500/CFX96
实验体系及程序:按说明书推荐
图1 QPR-303UD与TA/TB品牌灵敏度对比
Fig.1 Comparison of the sensitivity bewteen QPR-303UD and supplier TA/TB
以MS2RNA为模板,使用TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0(TOROIVD #QPR-303UD) 预混液以及市售其他品牌染探针一步法qPCR 试剂(来自Supplier TA、TB),在同样反应条件下对同一模板的4个浓度进行扩增。结果显示,在不同扩增体系上,与同类产品相比,TOROIVD #QPR-303UD预混液灵敏度高,扩增产物产量高,拥有超高的平台值。
█ QPR-303UD直扩SARS-CoV-2假病毒
实验材料:上海计量院提供的SARS-CoV-2假病毒
实验仪器:ABI7500/StepOne Plus QuantStudio 1/LineGene 9600 Plus
实验体系及程序:按说明书推荐
图2 QPR-303UD直扩SARS-CoV-2假病毒
Fig.2 Direct amplification of SARS-COV-2 pseudovirus using QPR-303UD
以上海计量院提供的SARS-CoV-2假病毒为模板,使用TOROIVD直扩裂解液(TOROIVD #RDB-200) 进行稀释,将模板稀释100copies/mL,使用TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0(TOROIVD #QPR-303UD) 预混液按照说明书推荐反应条件进行扩增。结果显示,在不同定量PCR仪上,均能稳定地检出100copies/mL N基因和ORF1ab基因。TOROIVD #QPR-303UD无需核酸提取步骤,极大地优化了检测流程,缩短了检测时间。
█ QPR-303UD去污染测试
实验材料:MS2RNA
实验仪器:CFX96
实验体系及程序:按说明书推荐
图3 QPR-303UD去污染测试
Fig.3 Decontamination test of QPR-303UD
以MS2RNA为模板,使用TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 2.0(TOROIVD #QPR-303UD) 预混液进行扩增,再将PCR产物进行纯化作为模板,使用不含UNG酶及核酸酶的QPR-303及QPR-303UD进行扩增。结果显示,QPR-303UD具有完全去除Ct值为30之上的含U的PCR产物核酸污染能力,且不对产品扩增性能有任何影响。
工厂地址: 江苏如东珠江路888号生命健康园20号楼
电话:+86-21-68030217/33782006/33782046
邮箱:market@toroivd.com