特别说明: 本品仅限于科学研究及实验室自检，不可直接用于诊断。              

　　高速高灵敏：该试剂盒可以通过探针实现对低拷贝靶点的快速、高灵敏度定量，适用于 DNA 病毒或低水平表达的 mRNA 逆转录产物的定量

　　可以进行多重引物探针扩增：该试剂盒经过验证，可同时检测多个目的基因，允许同时检测其它通道 以提高效率或质量控制目的。

　　高耐受性：该试剂盒独特的专有配方即使在存在通常会抑制 PCR 的物质（如肝素、血红素或 EDTA）的情况下也能提供强大的性能，从而增加您在处理各种复杂临床样本时的信心。

　　广泛的仪器兼容性：该试剂盒可以在快速或标准循环条件下运行，兼容绝大部分定量 PCR 仪。添加的 50×ROX 参考染料（未提供）可用于需要参考染料的实时荧光 PCR 仪。

　　避免污染：该试剂盒在反应缓冲液中含有 dUTP 和 UNG。可以去除 PCR 产物造成的交叉污染，从而降低假阳性率。

 1. QPT-200U-BB热稳定性验证

　　以非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72蛋白)的质粒为模板，以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，采用分别37℃温控15天，30天的QPT-200U-BB进行扩增，以-20℃保存的QPT-200U-BB为对照，实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图。

图1  QPT-200U-BB经37℃热加速15天的热稳定性比较	图2  QPT-200U-BB经37℃热加速30天的热稳定性比较

　　结果：QPT-200U-BB经过37℃热加速15天后和-20℃保存的性能无差异(图1), 经过37℃热加速30天后和-20℃保存的相比,仅落后0.5 Ct(图2)。

　　结论：QPT-200U-BB可在15天内室温进行运输,可与2-8℃进行保存,体现了极强的热稳定性，降低了运输成本，提高了使用简便性。

 2. QPT-200U-BB抗抑制能力检测

　　以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，剪取米粒大小(50mg左右) 猪组织样品置于含1mL裂解液(含5%TritonX-100 TE 缓冲液)的研磨管中，加入研磨珠在小型组织研磨器研磨3min;离心上清取5uL用QPT-200U-BB检测。实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图。

QPT-200U-BB直扩性能验证

　　结果:  QPT-200U-BB扩增结果曲线一致，表明结果正常。

　　结论：QPT-200U-BB在模板未经提取的情况下仍能正常扩增，体现了很强的抗抑制能力，可用于样品的直扩。

 3. QPT-200U-BB 直扩性能检测

图4 QPT-200U-BB :猫孢疹病毒实际样品的直扩

　　采用客户提供实际猫孢疹病毒样品，以及客户提供的引物探针，采用QPT-200U-BB进行直扩，均能完整扩增，实验体系及程序按说明书推荐，结果如左图。

　　注：直扩反应中客户提供的样品保存液为市面上最通用的采样液，且样品稀释10倍所用稀释液也为客户提供采样液，表明QPT-200U-BB 在该方面具有很高的适应性。

　　结果:  QPT-200U-BB正常扩增，且扩增曲线与原始曲线都保持一致。

　　结论：QPT-200U-BB在样品的直扩方面表现优异。

　　在直扩方面，若需达到最佳结果，可能需对反应进行优化，可联系本公司进行调优。

 4. QPT-200U-BB多重PCR扩增检测

　　以客户提供实际样品为模板，以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，用QPT-200U-BB检测非瘟/野毒/疫苗毒/内参，共四通道验证，实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图：

图5  QPT-200U-BB扩增四重引物探针mix

          结果:  QPT-200U-BB扩增结果，四通道曲线正常，表明结果准确。

          结论：QPT-200U-BB在四重引物探针作用下均能正常扩增，提高检测效率，表明QPT-200U-BB可用于多重PCR扩增。

         TOROIVD^® 5G qPCR Premix BB with UNG是一种快速的2×预混液，可对多达五个 DNA靶标进行灵敏、 可重复的检测。特别适用于使用探针法进行病毒检测，该混合物包括 TOROIVD^® 5G DNA 聚合酶、UNG 酶、dNTPs 和反应缓冲液。改进的酶和反应混合物的组合还可以实现对 PCR 抑制剂的抗抑制能力和室 温下的高稳定性。该混合物适用于高通量分析，在 UNG 酶的作用下，可以降低交叉污染的风险。该预混液适用于高速 qPCR，可准确检测和定量靶标，从而在宽泛的线性范围内获得高度可重复且可靠的实时 PCR 结果。

　　名称：TOROIVD^® 5G qPCR Premix BB with UNG(中文名:高速高灵敏防污染探针法qPCR预混液(直扩型)）

　　货号:   QPT-200U-BB

　　规格:   20µL×500次

　　试剂盒于-20℃长期保存，在 2℃-8℃可保存 1 年，使用前请完全融化