特别说明:仅限科学实验,不可用于人及动物临床诊断。
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家猪和野猪传染病,所有品种和年龄的猪均可感染,根据病毒毒力不同,其临床症状可分为超急性、急性、亚急性到慢性。急性型的以高热、网状内皮系统出血和高致死率为特征。临床诊断和尸检都不能区分ASF与古典猪瘟(CSF)区分,对猪的任何急性发热性出血综合征进行诊断鉴别均应考虑这两种疫病。细菌性疫病引起的败血症也可能同ASF和CSF混淆,通过核酸检测诊断鉴别这些疫病非常必要。荧光PCR是一种优异、敏感性高、特异性好且快速的ASFV检测技术,可适用在各种情况下筛查和确认疑似病例。
该检测管基于荧光探针的RT-qPCR技术原理,B646L基因的引物探针序列来自世界动物组织(WOAH)[1],可高特异地检测非洲猪瘟病毒,探针的5’端以VIC标记。检测管内包含内标DNA和对应的引物探针组,探针的5’端以ROX标记。在RT-qPCR过程中,聚合酶水解荧光探针的信号可被荧光PCR仪实时收集,从而可对样本中的非洲猪瘟病毒进行检测。内标用于监控整个RT-qPCR过程,包括试剂、仪器及操作过程的有效性。
黄色曲线-VIC:内标监控实验有效性 绿色曲线-VIC:非洲猪瘟B646L基因
-若 IC -ROX 显示阴性 ( 无 Cq值 or Cq 值> 40),实验失败,需重新检测.
-若 IC -ROX 显示阳性 (Cq值 ≤40),,实验成功,按如下结果解释.:
1. 若 B646L基因-VIC显示阴性 ( 无 Cq值 or Cq 值> 40),非洲猪瘟阴性.
2. 若 B646L基因-VIC显示阳性,且15 < Cq值 <35,非洲猪瘟阳性.
3. 若 B646L基因-VIC显示阳性,且 Ct <15 或35 < Ct < 40, 需要重新检测.
【货号】 TS-8002R
【包装】 8 管/包
【组分】
冻干的0.2mL 定量PCR八连管,包含逆转录酶、RNase抑制剂、B646L基因和内标基因引物探针预混液,以及内标DNA模板。
2-8℃干燥条件下保存2年。开袋后,剩余试剂应干燥密封保存。吸潮后不建议使用。
【参考文献】
[1] 《OIE 陆生动物诊断试验与疫苗手册》,第3.9.1章,2021第八版。