1.  高速 PCR

　　使用 KAO-201 和进口 A 品牌按照各自说明书推荐的体系和程序对人基因组 DNA 进行扩增。KAO-201扩增时，1 kb 的目的片段延伸时间设定为 1 sec，1-10 kb 的目的片段延伸时间按 5 sec/ kb 设定。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果如下图所示：

图1 高速PCR

Fig.1 Rapid PCR 　　

　　结果：从琼脂糖凝胶电泳图中可以看到在扩增 4 kb 及 4 kb 以上的片段时，KAO-201 仍然可以得到清晰的单一扩增条带，而进口 A 品牌出现了模糊多带的情况。

　　结论：KAO-201 能够对长片段模板进行高速高保真的 PCR 扩增。

 2.  粗样品PCR

　　使用 KAO-201 和进口 A 品牌按照各自说明书推荐的体系和程序分别从血液和鼠尾裂解液中 PCR 扩增人的 β-globin 基因和小鼠的 Thy-1 基因。为避免误差，从低到高设置模板加样量为 1 µL、2 µL、3 µL、4 µL，PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳结果如图 2-a 和 2-b 所示：

图2 粗样品 PCR

Fig.2 PCR of  raw sample

　　结果：从血液直扩和鼠尾裂解直扩的琼脂糖凝胶电泳图中可以看到，使用 KAO-201 对两个粗样品扩增均可以得到清晰的电泳条带，而进口 A 品牌没有扩增条带。

　　结论：KAO-201 高保真酶具有高抗抑制性，能够用于粗样品的 PCR 扩增。

 3.  高保真度

　　选用多种 DNA 聚合酶并以人基因组 DNA 为模板扩增 β-globin 基因，对各PCR 产物进行 TA 克隆。随后从各克隆中抽提质粒，进行 Sanger 测序并确认序列，最后统计100,000碱基中的错配数用于保真度对比，碱基错配数如下图所示：

图3 高保真度

Fig.3 High fidelity

　　结果：普通 Taq DNA 聚合酶在100,000 碱基中的错配数最高，Flash KOD（KAO-201）在100,000 碱基中的错配数最低，保真性大约是普通 Taq DNA 聚合酶的 80 倍。

　　结论：KAO-201 具有高保真度，保真性大约是普通 Taq DNA 聚合酶的 80 倍，能有效避免 PCR 扩增中的碱基错配。