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RTM-002-100KU实验案例
来源: | 作者:toroivd | 发布时间: 2022-05-06 | 89 次浏览 | 分享到:

1.RTM-002-100KU与T品牌逆转录性能对比

   实验材料:MS2RNA

                  TOROIVD #QST-100

                  TOROIVD #RTM-002

                  T品牌高灵敏逆转录酶

  实验仪器:ABI Step One Plus

  实验体系及程序:按说明书推荐

图1 RTM-002-100KU与T品牌逆转录性能对比

Fig.1 Comparison of reverse transcription ability bewteen RTM-002 and supplier T


  以MS2RNA为模板,稀释MS2RNA到8ng及0.08ng两种添加量,逆转录产物稀释10倍后用QST-100进行定量PCR扩增,对比进口T品牌的高灵敏逆转录酶,及不添加RNase抑制剂对反应体系的影响。由图1可以看出,反应体系中必须添加RNase抑制剂,否则会对Cq值具有很大影响;对比T品牌的试剂,TOROIVD #RTM-002在低模板具有更好的逆转录效率,且△△Cq更接近理论值,即TOROIVD #RTM-002-100KU更适合△△Cq法为基础的基因表达分析。

2.RTM-002高温逆转录活性测试

  实验材料:MS2RNA

                   TOROIVD #QPT-200U

                   TOROIVD #RTM-002-100KU

  实验仪器:博日LineGine9600

  实验体系及程序:按说明书推荐


图2 RTM-002-100KU高温逆转录活性测试

Fig.2  Activity of reverse transcriptional test of RTM-002 for high temperature


  以MS2RNA为模板,稀释MS2RNA到1000copies、100copies、100copies、1copies,使用TOROIVD #QPT-200U和RTM-002设置一步法反应程序,采用温度梯度设置从50-60℃的温度梯度。由图2可以看出,在1000copies模板浓度范围内,逆转录从50-60℃所得到的Cq值波动范围在1之内,说明TOROIVD #RTM-002-100KU具有宽广的高温逆转录活性范围。




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