1.如何解决电泳条带模糊的问题?
答:降低电压,加大Marker的上样量,使用新的凝胶,检查是否加入了核酸染料。
2.Marker跑胶拖带或跑不开
答:(1)电压:按照推荐的电泳条件,1 × TAE缓冲液,0.8% - 2.0%琼脂糖凝胶,正负极之间电压4 - 10 V/cm(常规电泳仪建议125V电压)跑胶。
(2)染料类型:如果大分子染料建议使用泡染法或者预混法。
(3)琼脂糖凝胶:①建议在溶胶时使琼脂糖颗粒全部溶解,若使用微波炉加热进行溶解,可以让液体沸腾2-3次。②确保胶充分冷却凝结,30-60min为宜,如果不能及时使用,要放在TAB/TBE液体中保存。
(4)试剂保存条件:放在4度保存,避免反复冻融。
3.能不能用作聚丙烯酰胺凝胶电泳Marker?
答:不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。
4.Marker条带弯曲
答:(1)电压过高或电压不稳;
(2)如果使用大分子染料,建议使用泡染法或者预混法;
(3)Marker加在胶两端的孔容易出现条带弯曲;
(4)更换新鲜的缓冲液。
(5)琼脂糖颗粒未完全溶解或凝胶时间过短,30-60min为宜。