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高灵敏高特异性一步法RT-PCR试剂盒
TOROIVD® One Step RT-PCR Kit (Dye Plus) |
高灵敏度：可有效扩增低至 1fg 的 3kb 以下 RNA 模板。
高特异性：高温逆转录及热启动技术有效抑制错配和引物二聚体造成非特异性扩增。
高保真度：使用具校正活性的高保真 KOD 酶，产物适合克隆或测序监控 RNA 变异。
使用简便：一管内即可同时进行逆转录及 PCR，实现一步法 RT-PCR。
TOROIVD® One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)是 TOROIVD 开发的一款高灵敏高特异一步法 RT-PCR 试剂盒。本试剂以 RNA 为模板，逆转录及 PCR 反应在同一个管进行，反应液中含有电泳上样指示剂， 产物可直接进行电泳。既降低了样本间交叉污染，又提高了检测通量。 本试剂盒采用定向进化的高灵敏、高延伸能力 TOROIVD®Ⅲ逆转录酶以及具 Taq 酶 80 倍以上保真 度的热启动 KOD 酶，可高特异地扩增极低拷贝的 RNA 模板。
灵敏度比较
使用MS2 RNA约2 kb及约3.5 kb的目的片段，延伸时间按15 sec./ kb设定，比较检测的灵敏度。反应根据说明书进行。结果显示，以15 sec./ kb的速度扩增时，TOROIVD® One Step RT-PCR Kit (Dye Plus) 可以扩增低至1fg的 RNA模板。
图1. 不同模板浓度条件下KRT-200灵敏度比较
品牌 | 名称 | 灵敏度 |
TOROIVD | One Step RT-PCR Kit (Dye Plus) | 0.001pg |
Invitrogen | SuperScript™ IV One-Step RT-PCR System | 0.01pg |
Takara | PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2 | 0.1pg |
Vazyme | HiScript II One Step RT-PCR Kit | 1pg |
表1. 不同品牌One Step RT-PCR Kit灵敏度比较
TOROIVD® One Step RT-PCR Kit (Dye Plus)（KRT-200P）采用 50μL 反应体系可使用 40 次，组成要成分如下：
货号 组分 包
组分货号 | 组分名称 | 包装规格 | 数量 | 保存温度 |
KRT-200P | TOROIVD® RT Enzyme Mix | 100μL/管 | 1管 | -20℃保存
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| 2×TOROBlue® Flash KOD Dye Mix | 1mL/管 | 1管 | -20℃保存 |
DNase/RNase-Free Water | 1mL/管 | 1管 | -20℃保存 |
本试剂请在-20°C保存。
