室温反应,强力去除PCR产物污染的UNG酶。
热敏UNG酶 Heat-labile Uracil N-Glycosylase |
强防污染能力:可有效清除含dU的PCR扩增产物,有效避免核酸检测假阳性。
使用方便:室温体系配制时即可清除,≥50℃逆转录过程即可失活,无需额外步骤。
低扩增抑制:热敏性,对RNA和dT-DNA无活性且≥50℃逆转录或95℃预变性可完全失活,对逆转录及PCR扩增无影响。
UNG-002YL时与K品牌防污染能力对比
实验材料:使用1-Step RT-qPCR试剂扩增MS2RNA的PCR产物
实验仪器:ABI7500
实验体系及程序:按说明书推荐
图1 UNG-002YL时与K品牌防污染能力对比
Fig.1 Anti-pollution capacity bewteen UNG002YL and supplier K
以MS2RNA为模板,使用TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit(TOROIVD #QPR-303)预混液进行扩增,再将PCR产物进行纯化作为模板(含U和T)。
图1-A:扩增中不添加UNG002YL时,PCR产物污染可大量扩增。
图1-B:添加UNG-002YL和K品牌UNG酶同时对比清除效果,K品牌不能完全清除,UNG-002YL可完全清除高浓度的PCR产物污染。
Heat-labile Uracil N-Glycosylase(热敏UNG酶,Heat-labile UDG或Heat-labile UNG)是一种来源于嗜冷海洋细菌(psychrophilic marine bacterium)UNG基因经大肠杆菌菌株重组表达并经过多步纯化工序精细制备的重组蛋白。
UNG酶可催化水解含有dU的DNA单链或双链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶,由此DNA单链或双链上产生的无碱基位点很容易被水解而断裂。UNG酶对RNA和dT-DNA无活性,可清除使用dUTP的反应体系产生的PCR产物。
非热敏UNG酶难以完全灭活,其残留活性会降解含dU扩增产物,从而降低PCR扩增性能。
本公司所开发的热敏UNG酶可在室温下作用,且对温度敏感、易于灭活,50℃以上就可使该酶不可逆失活。室温体系配制时即可清除反应体系中的PCR产物污染,适用于PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR体系,降低核酸检测假阳性。
本试剂组产品货号: UNG002YL-1mL, UNG002YL-100mL
组分货号 | 组分名称 | 包装规格 | 数量 |
UNG002YL-1mL | Heat-labile Uracil N-Glycosylase | 1mL/管,1KU | 1 管 |
UNG002YL-100mL | Heat-labile Uracil N-Glycosylase | 100mL/瓶,100KU | 1瓶 |
-15~-20℃条件下可保存2年,避免反复冻融。
请使用干冰或-15~-20℃冷链运输。
1. 问:贵司酶使用时的注意事项?
答:(1)推荐用量:50μLPCR 反应体系中加入0.2-0.6μL,实际使用量根据具体实验进行改进和优化;
(2)UNG002YL消化防污染:PCR反应体系37℃ 2-10 min,可以根据实验的需要进行调整;
(3)正常启动 PCR 程序。
工厂地址: 江苏如东珠江路888号生命健康园20号楼
电话:+86-21-68030217/33782006/33782046
邮箱:market@toroivd.com