抗体热启动PCR聚合酶
抗体热启动PCR聚合酶 TOROIVD® 5G DNA polymerase |
TOROIVD® 5G DNA Polymerase(MFP-207)是基于Tth DNA聚合酶经定向进化改造而来的一款多功能PCR聚合酶。该酶采用高封闭热启动抗体修饰实现热启动PCR,具有高扩增速度、高灵敏度及高抗抑制性等优良特征。MFP-207配合专配的缓冲液系统,可稳定检出3 copies/反应的靶标,被广泛用于DNA/RNA病毒检测、低浓度模板扩增及基因表达分析等用途。
超高速高灵敏:高5’→3’外切酶活性和高封闭效率增强了检测信噪比,可稳定扩增3 copies/反应靶标。
高扩增速度:通过改造提高5’→3’聚合酶活性,可进行高速qPCR检测。
高抗抑制能力:配合优化缓冲液可对全血、血清、血浆及细胞组织进行简单裂解后或直接扩增。
高稳定性:37℃热加速一周检测性能无变化。
MFP-207性能验证:使用非洲猪瘟病毒B636L基因质粒稀释到3900copies,390copies,39copies及3.9copies及四个模板梯度,引物探针序列采用WOAH设计。
如图a所示:MFP-207可稳定检测3-4 copies/反应非洲猪瘟病毒,具有极高的灵敏度;
相比T公司聚合酶,3.9copies/反应的检出具有更高的信噪比及检出稳定性。
如图b所示:MFP-207和buffer进行37℃热加速一周,其性能与-20℃下的性能完全一致,满足IVD诊断原料用途。
如图c&d所示:配合高速PCR仪,可以将PCR时间控制在30 min以内。
结果表明:MFP-207具有超高灵敏度、高热稳定性和高扩增速度。
组分货号 | 组分名称 | 包装规格 | 数量 | 目录价格 | 保存温度 |
MFP-207 | TOROIVD® 5G Polymerase(含GB buffer) | 50μL/管,200U | 1 | 200元 | -20℃冷冻保存 有效期24个月 |
MFP-207-1mL | TOROIVD® 5G Polymerase(含GB buffer) | 1mL/管,4KU | 1 | 2000元 | -20℃冷冻保存 有效期24个月 |
1.试剂盒-20℃冷冻保存,有效期24个月。运输过程中,温度应为于-15℃到-25℃冷链。
2.试剂开封后,置于4℃条件下保质期为60天,-20℃条件下保质期为24个月。
3.2×5G qPCR Buffer GB请室温完全融化后使用,否则会降低使用效果。
特别提示:
1. 对于未经提取的粗样品模板DNA,氯化镁浓度可能需要优化调整,推荐最终浓度为2.5-8mM。可能需要添加BSA和TritonX-100来提高粗样品裂解能力。
2. 引物浓度应在0.2-0.8μM之间优化,TaqMan®探针应在0.1-0.4μM之间优化。
█ MFP-207多重PCR扩增
实验材料:非洲猪瘟病毒质粒
TOROIVD MFP-207
实验仪器:博日LineGine9600
实验体系及程序:按说明书推荐
图1 MFP-207多重PCR扩增
Fig.1 Multiple PCR amplification of MFP-207
以非洲猪瘟病毒质粒为模板,将使用TOROIVD® 5G DNA polymerase (GB buffer)(TOROIVD #MFP-207) 预混液分别以说明书推荐的常规反应条件和体系、优化后的反应条件和体系对非洲猪瘟病毒的4个基因进行扩增。结果显示,优化后4个通道荧光信号均有提高,CT值均靠前1-2个,这表明TOROIVD #MFP-207适合多重PCR,实现单管内同时分析多个靶标或内标,降低试剂成本及提高分析效率。
工厂地址: 江苏如东珠江路888号生命健康园20号楼
电话:+86-21-68030217/33782006/33782046
邮箱:market@toroivd.com