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高速高灵敏高特异防污染探针一步法RT-qPCR预混液
TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G kit 3.0 |
特别说明: 本品仅限于科学研究及实验室自检，不可直接用于诊断。
高速高灵敏：本试剂可进行高速 PCR 分析，配合高速 PCR 仪时间可以缩短到 30min 以内，适合分子POCT 用途。
适合多重 RT-qPCR：本试剂已经验证可进行五重 RT-qPCR 分析，实现单管内同时分析多个靶标或内标，降低试剂成本及提高分析效率。
强防污染能力：采用热敏 UNG 酶和微量热敏双链 DNA 核酸酶双酶系统构成强有力的污染清除系统，可有效清除气溶胶中 PCR 扩增产物污染，最大程度避免检测假阳性。
1.QPR-304UD灵敏度测试
实验材料：上海计量院提供的SARS-CoV-2标准品
TOROIVD QPR-304UD
实验仪器：博日LineGine9600
实验体系及程序：按说明书推荐
图1 QPR-304UD灵敏度测试
Fig.1 Sensitivity test of QPR-304UD
以上海计量院提供的SARS-CoV-2标准品为模板，使用TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 3.0(TOROIVD #QPR-304UD) 预混液按照说明书所推荐的条件及体系进行实验，对SARS-CoV-2的N基因和ORF1ab基因进行低拷贝扩增。结果显示，TOROIVD #QPR-304UD可稳定检测2-3copies高灵敏度扩增SARS-CoV-2 ，这表明TOROIVD #QPR-304UD预混液灵敏度高。
2.QPR-304UD热稳定性测试
实验材料：MS2RNA
TOROIVD #QPR-304UD
实验仪器：CFX96
实验体系及程序：按说明书推荐
图2 QPR-304UD热稳定性测试
Fig.2 Stability test of QPR-304UD
以MS2RNA为模板，实验组：
A：QPR-304UD 酶混合液，分别在-20℃冰箱和37℃金属浴保存7天。
B：QPR-304UD 酶混合液中 260ul 中加入END-UD13酶混合液稀释液40ul 充分混合，分别在-20℃冰箱和 37℃金属浴保存7天。25ul 反应体系中酶混合液添加量提升为 1.5ul。
C：QPR-304UD酶混合液中 260ul 中加入END-UD13酶混合液稀释液240ul 充分混合，分别在-20℃冰箱和37℃金属浴保存7天。25ul 反应体系中酶混合液添加量提升为 2.5ul。
由图2可看出，QPR-304UD经过 37℃热加速后性能保持不变，通过添加 END-UD13酶混合液稀释液提升酶混合液添加量到1.5ul或2.5ul时，依然保持优良的热稳定性。
TOROIVD® Probe 1-step RT-qPCR 5G Kit 3.0可在单管内同时进行高灵敏高重复的多重RT-qPCR分析，能检测多达5个RNA/DNA靶点。该试剂盒采用TaqMan®探针检测病毒，包括UNG酶、dsDNase酶、耐高温MMLV逆转录酶、RNase抑制剂、TOROIVD® 5G DNA聚合酶和反应缓冲液。改进的酶提高了对PCR抑制剂的高耐受性和在酶自身的热稳定性。该一步试剂由于其反应设置简单，适用于高通量分析。该试剂盒适用于高速RT-qPCR，可实现对目标的准确检测和定量有可能在广泛的动态范围内获得高可重复性和可靠的实时PCR结果。
组分货号 | 组分名称 | 包装规格 | 数量 | 保存温度 |
QPR303UD13 | RT-qPCR Enzyme MixUD | 260μL/管 | 1管/袋 | -25- -15℃ 避光保存两年 |
ASF101GB | 2×5G qPCR Buffer GB | 1.25mL/管 | 2管/袋 | -25- -15℃ 避光保存两年 |
1.试剂盒-20℃冷冻保存，有效期24个月。运输过程中，温度应为-15℃到-25℃冷链。
2.试剂开封后，置于4℃条件下保质期为60天，-20℃条件下保质期为24个月。
3.2×5G qPCR Buffer BB请室温完全融化后使用，否则会降低使用效果。
