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  • TOROIVD®5G qPCR Premix
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  • TOROIVD®5G qPCR Premix

    基于5G酶的高稳定2×定量PCR预混液


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    商品描述

    基于5G酶的高稳定2×定量PCR预混液




     基于5G酶的高稳定2×定量PCR预混液


     TOROIVD® 5G qPCR Premix

          特别说明: 本品仅限于科学研究及实验室自检,不可直接用于诊断              


      高速高灵敏:该试剂盒可以通过探针实现对低拷贝靶点的快速、高灵敏度定量,适用于 DNA 病毒或低水平表达的 mRNA 逆转录产物的定量

      可以进行多重引物探针扩增该试剂盒经过验证,可同时检测多个目的基因,允许同时检测其它通道 以提高效率或质量控制目的。 

      高耐受性该试剂盒独特的专有配方即使在存在通常会抑制 PCR 的物质(如肝素、血红素或 EDTA)的情况下也能提供强大的性能,从而增加您在处理各种复杂临床样本时的信心。 

      广泛的仪器兼容性该试剂盒可以在快速或标准循环条件下运行,兼容绝大部分定量 PCR 仪。添加的 50×ROX 参考染料(未提供)可用于需要参考染料的实时荧光 PCR 仪。

    1. QPT-200热稳定性验证

      以非洲猪瘟病毒B636L基因(编码VP72蛋白)的质粒为模板,以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,采用分别37℃温控7天,14天的QPT-200进行扩增,以-20℃保存的QPT-200为对照,实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图:

    图1  QPT-200经37℃热加速7天的稳定性比较图2  QPT-200经37℃热加速14天的稳定性比较

      结果:  由图,QPT-200经过37℃分别热加速7天和14天后与-20℃保存的性能无差异。

      结论:QPT-200可在14天内室温进行运输,可与2-8℃进行保存,体现了极强的热稳定性,降低了运输成本,提高了使用简便性。


    2. QPT-200抗抑制能力检测

      以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,剪取米粒大小(50mg左右) 猪组织样品置于含1mL裂解液(含5%TritonX-100 TE 缓冲液)的研磨管中,加入研磨珠在小型组织研磨器研磨3min;离心上清取5uL用QPT-200检测。实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图:


     

    3  QPT-200直扩性能验证

     

      结果:QPT-200扩增结果曲线一致,表明结果正常。

      结论:QPT-200在模板未经提取的情况下仍能正常扩增,体现了很强的抗抑制能力,可用于样品的直扩。


    3. QPT-200多重PCR扩增检测

      以客户提供实际样品为模板,以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针,用QPT-200检测非瘟/野毒/疫苗毒/内参,共四通道验证,实验体系及程序按说明书推荐,结果如下图:

     

     

    4  QPT-200扩增四重引物探针mix


      结果:QPT-200扩增结果,四通道曲线正常,表明结果准确。

      结论:QPT-200在四重引物探针作用下均能正常扩增,提高检测效率,表明QPT-200可用于多重PCR扩增。

      TOROIVD® 5G qPCR Premix 是一种快速的2×预混液,可对多达五个 DNA靶标进行灵敏、 可重复的检测。特别适用于使用探针法进行病毒检测,该混合物包括 TOROIVD® 5G DNA 聚合酶、UNG 酶、dNTPs 和反应缓冲液。改进的酶和反应混合物的组合还可以实现对 PCR 抑制剂的抗抑制能力和室温下的高稳定性。该混合物适用于高通量分析,本试剂可以与 UNG 酶连用,可以降低交叉污染的风险。该预混液适用于高速 qPCR,可准确检测和定量靶标,从而在宽泛的线性范围内获得高度可重复且可靠的实时 PCR 结果。


      名称:TOROIVD® 5G qPCR Premix (中文名:天筛® qPCR 预混液)

      货号:   QPT-200

      规格:   20ul×500次


    组分货号

    组分名称

    包装规格

    数量

    保存温度

    QPT-200

    TOROIVD® 5G qPCR Premix 

    (中文名:天筛® qPCR 预混液)

    1mL/管

    5 管

    2-8℃

    保存一年


      试剂盒于-20℃长期保存,在 2℃-8℃可保存 1 年,使用前请完全融化。



    1. 问:该试剂适用哪些种型号的仪器? 

        答: 已经验证的仪器包括Roche LightCycler 96,ABI Step One Plus,西安天隆 Gentier 96R和Gentier 48E,杭州博日LineGene 9600 Plus, Biorad CFX 96,ABI QuantStudio 1,杭州柏恒Q1600及宏石SLAN-96S 等实时荧光定量PCR检测系统;其它仪器未验证,我们可以配合验证。


    2. 问:能否兼容其它试剂的循环条件?

        答: 我司试剂能兼容绝大部分其它试剂的循环条件,但是要来电咨询是否可以完全替代。


    3. 问:能否兼容其它快速仪器的快速循环条件?

        答: 我司能兼容绝大部分快速循环条件,但是各个快速仪器的控制温度精度及采光有差异,请来电咨询协助微调优化。


    4. 问:试剂可以在-20℃保存吗?

        答:试剂在-20℃保存三年以上,但是每次使用时需要完全室温融化,不可有任何结晶,否则影响性能. 所以为了使用方便,建议 2-8℃稳定保存一年。


    5. 问:荧光曲线前期基线期不平整,有波动?

        答:试剂未完全解冻,需于室温静置 30min 使其完全恢复至室温。模板与体系未完全混匀,加样时将模 板加入液面以下。


    6. 问:荧光曲线未出现平台期?

        答:优化引物探针设计和引物探针使用浓度。


    TOROIVD® 5G qPCR Premix.pdf


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