1. 问：该试剂适用哪些种型号的仪器?　

    答: 已经验证的仪器包括Roche LightCycler 96，ABI Step One Plus，西安天隆 Gentier 96R和Gentier 48E，杭州博日LineGene 9600 Plus， Biorad CFX 96，ABI QuantStudio 1，杭州柏恒Q1600及宏石SLAN-96S 等实时荧光定量PCR检测系统；其它仪器未验证，我们可以配合验证。

2. 问：能否兼容其它试剂的循环条件?

    答: 我司试剂能兼容绝大部分其它试剂的循环条件，但是要来电咨询是否可以完全替代。

3. 问：能否兼容其它快速仪器的快速循环条件?

    答: 我司能兼容绝大部分快速循环条件，但是各个快速仪器的控制温度精度及采光有差异，请来电咨询协助微调优化。

4. 问：试剂可以在-20℃保存吗?

    答：试剂在-20℃保存三年以上，但是每次使用时需要完全室温融化，不可有任何结晶,否则影响性能。所以为了使用方便，建议 2-8℃稳定保存一年。

5. 问：荧光曲线前期基线期不平整，有波动？

    答：试剂未完全解冻，需于室温静置 30min 使其完全恢复至室温。模板与体系未完全混匀，加样时将模 板加入液面以下。

6. 问：荧光曲线未出现平台期？

    答：优化引物探针设计和引物探针使用浓度。

█ QPT-200热稳定性验证

　　以非洲猪瘟病毒B636L基因（编码VP72蛋白）的质粒为模板，以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，采用分别37℃温控7天，14天的QPT-200进行扩增，以-20℃保存的QPT-200为对照，实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图：

图1  QPT-200经37℃热加速7天的稳定性比较	图2  QPT-200经37℃热加速14天的稳定性比较

　　结果：由图，QPT-200经过37℃分别热加速7天和14天后与-20℃保存的性能无差异。

　　结论：QPT-200可在14天内室温进行运输，可与2-8℃进行保存，体现了极强的热稳定性，降低了运输成本，提高了使用简便性。

█ QPT-200抗抑制能力检测

　　以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，剪取米粒大小（50mg左右）猪组织样品置于含1mL裂解液（含5%TritonX-100 TE 缓冲液）的研磨管中，加入研磨珠在小型组织研磨器研磨3min；离心上清取5uL用QPT-200检测。实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图：

图3  QPT-200直扩性能验证

　　结果：QPT-200扩增结果曲线一致，表明结果正常。

　　结论：QPT-200在模板未经提取的情况下仍能正常扩增，体现了很强的抗抑制能力，可用于样品的直扩。

█ QPT-200多重PCR扩增检测

　　以客户提供实际样品为模板，以世界动物卫生组织公布的序列合成引物探针，用QPT-200检测非瘟/野毒/疫苗毒/内参，共四通道验证，实验体系及程序按说明书推荐，结果如下图：

图4  QPT-200扩增四重引物探针mix

　　结果：QPT-200扩增结果，四通道曲线正常，表明结果准确。

　　结论：QPT-200在四重引物探针作用下均能正常扩增，提高检测效率，表明QPT-200可用于多重PCR扩增。